Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem: http://repositoriodigital.uns.edu.ar/handle/123456789/2113
Título : Regulación de la función vascular por progesterona : mecanismos celulares y moleculares
Autor(es) : Cutini, Pablo Hernán
Director(es) : Massheimer, Virginia Laura
Palabras clave : progesterona; enfermedad vascular; menopausia
Fecha de publicación : 2010
Resumen : El sistema vascular es regulado por numerosos factores y hormonas, incluyendo el esteroide ovárico progesterona (Pg). La menopausia es un proceso fisiológico que se caracteriza por el cese de la actividad ovárica con la subsecuente declinación de la producción de estrógenos y Pg. Si bien existe una vasta evidencia en la literatura que reporta los efectos de los estrógenos sobre el sistema vascular, el conocimiento actual sobre la regulación del metabolismo vascular por Pg es menor. En este trabajo de Tesis se investigó la acción de Pg sobre la regulación de eventos celulares y moleculares que participan activamente en la homeostasis vascular. Empleando tejido aórtico murino como sistema experimental, se demostró que concentraciones fisiológicas de Pg estimulan rápida y significativamente la acti-vidad de las quinasas PKC y MAPK, como así también la producción de óxido nítrico (NO). El incremento en la produc-ción del vasoactivo es dependiente de la participación de MAPK y del calcio intracelular. Este efecto no es mediado por PKC. Pg inhibe significativamente la proliferación de células endoteliales (CE). La preincubación de CE con el compuesto L-NAME (inhibidor de la óxido nítrico sintasa) y el compuesto chelerythrine (inhibidor de PKC) suprime el efecto antipro-liferativo de la hormona. Por otro lado, la hormona ejerce un efecto proliferativo sobre células de músculo liso vascular (CMLV) en forma dependiente de la participación de MAPK, PKC y ciclooxigenasa (COX). La acción mitogénica de Pg sobre CMLV se anula cuando el tratamiento hormonal se realiza en presencia de medio de cultivo proveniente de CE tratadas previamente con la hormona. Se obtuvo evidencia de que Pg estimula la migración de CE y CMLV. En CE, Pg inhibe la a-gregación plaquetaria a través de un mecanismo de acción que involucra la participación del NO derivado de endotelio. Se observó un incremento de la apoptosis de CE cuando las mismas se tratan con Pg, aunque el esteroide revierte el efecto apoptótico inducido por peróxido de hidrógeno (H2O2). Además, la hormona previene la adhesión de monocitos sobre CE inducida por el agente proinflamatorio LPS, sin embargo, no afecta la adhesión basal de los mismos. El incremento de los niveles de ARNm de las moléculas de adhesión P-selectina, E-selectina y VCAM-1 inducidas por LPS se reducen parcialmen-te cuando las CE son pretratadas con Pg. Tratamientos con-juntos de 17-β-estradiol (E2) con Pg potencian la producción de NO inducida por cada hormona. En cambio, el tratamiento en simultáneo con ambos esteroides invierte el efecto indi-vidual de cada hormona sobre proliferación de CMLV. En con-junto, los datos reportados en este trabajo de Tesis aportan conocimientos sobre el rol de Pg en la homeostasis vascular. Se obtuvo evidencia de que progesterona regula el metabo-lismo vascular a través de un mecanismo de acción que invo-lucra efectos genómicos y no genómicos, modulando la pro-ducción de óxido nítrico, la adhesión celular, la proliferación y la migración celular, la apoptosis, y la expresión de moléculas de adhesión celular.
The vascular system is regulated by several factors and hormones, including the ovarian steroid progesterone (Pg). Menopause is a physiological process characterized by the cessation of ovarian activity and subsequent decline of estrogen and progesterone production. Although there is much evidence in the literature about the effects of estrogen on vascular system, the current knowledge on the regulation of vascular metabolism by Pg is scarce. In this Thesis we investigated the effect of Pg on the regulation of cellular and molecular events that are actively involved in vascular homeostasis. Employing murine aortic tissue as experimental system we showed that physiological concentrations of Pg rapidly and significantly stimulated PKC and MAPK activities, as well as nitric oxide (NO) production. The hormonal stimu-lation of vasoactive synthesis was dependent on MAPK and intracellular calcium transduction systems, but did not involve PKC participation. On cellular growth, Pg exhibited an antipro-liferative effect in endothelial cells (EC) and mitogenic action on vascular smooth muscle cells (VSMC). Preincubation of EC with the compound L-NAME (nitric oxide synthase inhibitor) or with the compound chelerythrine (PKC inhibitor) suppressed the antiproliferative effect of the hormone. On the other hand, the mitogenic action on VSMC was dependent on MAPK, PKC and cyclooxygenase (COX) participation. In addition, the proliferative effect on VSMC by Pg was suppressed in the presence of culture medium obtained from EC pretreated with the hormone. We also found that Pg stimulated EC and VSMC mobilization and migration. When platelet activation was studied, Pg inhibited platelet aggregation through a mecha-nism of action that involves the steroid stimulation of endo-thelium NO production. The hormone modulated EC apoptosis. Although an increase in EC apoptosis was detected after Pg treatment, the steroid reversed the hydrogen peroxide induced apoptotic effect. In addition, the hormone prevented LPS-induced monocytes adhesion to EC. However, Pg did not affect basal level of monocytes adhesion. The addition of LPS to EC enhanced P-selectin, E-selectin and VCAM-1 mRNA expression. This effect was partially suppressed when the EC were pretreated with Pg prior to LPS exposure. Finally, we provided evidence that combined treatment with 17-β-estra-diol and Pg potentiated the stimulatory effect of each steroid on NO production. In contrast, simultaneous treatment with both steroids reversed the individual effect of each hormone on VSMC proliferation. Overall, the data reported in this thesis contribute to the knowledge of the role of Pg in vascular homeostasis. We obtained evidence that progesterone regu-lates the vascular metabolism through a mechanism of action that involves genomic and non genomic effects, modulating nitric oxide production, cell proliferation and migration, apop-tosis, and leukocyte adhesion.
URI : http://repositoriodigital.uns.edu.ar/handle/123456789/2113
Aparece en las colecciones: Tesis de postgrado

Ficheros en este ítem:
Fichero Tamaño Formato  
CUTINI.pdf2,96 MBAdobe PDFVisualizar/Abrir