Especificidad en la expresión de la línea p11256-GUS en gemas de Marchantia polymorpha L.

Abstract

El interés por Marchantia polymorpha está creciendo en los últimos años. Su facilidad de manejo en laboratorio, la disponibilidad de la secuencia de todo el genoma y la ubicación estratégica que ocupa en la evolución de las plantas terrestres la vuelven una planta modelo que permite hacer inferencias de desarrollo y evolutivas para las plantas. En distintos momentos, a lo largo del desarrollo de un organismo y bajo diferentes condiciones, los genes son expresados. La transcripción de un gen está a cargo de secuencias llamadas promotoras, las cuales poseen información de la temporalidad y especificidad de cada gen. La utilización de genes reporteros permite detectar la expresión de un gen de interés en un momento y sitio específico. El objetivo principal de esta investigación fue caracterizar la actividad de los promotores pertenecientes a los genes MpHHE y p85, correspondientes a un gen responsable de producir la proteína llamada hemeritrina y a una secuencia cuya naturaleza es desconocida, respectivamente. Para esto se analizó el patrón de expresión de líneas de Marchantia polymorpha transformadas genéticamente mediante el uso de Agrobacterium tumefaciens. Dichas líneas fueron modificadas insertando una construcción molecular conteniendo los promotores de los genes MpHHE y p85 fusionados transcripcionalmente con el gen reportero GUS (construcción p11256–GUS y p85–GUS, respectivamente). Se analizó entonces la expresión del gen reportero a lo largo del crecimiento vegetativo, desde estadio de gema y durante 15 días. Se analizaron seis líneas las cuales contenían la construcción p11256–GUS, dos de ellas presentaron expresión únicamente en gemas y cuatro en distintos momentos del crecimiento. Este gen mostró tendencia a expresarse mayormente en las gemas de Marchantia polymorpha, aunque se vio variación en los patrones observados atribuible a la aleatoriedad con que se insertó la construcción p11256–GUS. El interés de identificar promotores tejido–específico radica en la posibilidad de caracterizar finamente el desarrollo de las plantas y poder asignar la identidad celular visualmente gracias a la expresión de genes reporteros.